上海遠慕生物科技有限公司

    上海遠慕生物科技專(zhuān)業(yè)提供大鼠ELISA試劑盒的說(shuō)明使用，價(jià)格，規格，型號，用途，性能等資訊，本司專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口/國產(chǎn)ELISA試劑盒，酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，培養基，抗體，動(dòng)物血清，標準品對照品，化學(xué)試劑，實(shí)驗耗材，為客戶(hù)提供免費代測ELISA試劑盒服務(wù)，一周內出結果，咨詢(xún)！

    中文名：大鼠ELISA試劑盒

    別名：大鼠ELISA Kit

    供應商：上海遠慕

    規格：48t/96t

    保存：2-8℃

    有效期：6個(gè)月

    范圍：科研實(shí)驗等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷。

    特點(diǎn)：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡(jiǎn)便。

    用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

    檢測種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。

    樣本類(lèi)型：適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本。

液體類(lèi)標本：

    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

    1）血漿：

    應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

    2）血清：

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

    3）組織標本：

    切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

    4）細胞培養上清：

    檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

    5）尿液：

    用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

   嚴格注明：

    1. 用戶(hù)在初次使用試劑盒時(shí)，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。

    2. 每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。

    3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。

    4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過(guò)氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過(guò)氧化物酶標記親和素工作液。

    5. 建議檢測樣品時(shí)均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。

大鼠ELISA檢測試劑盒性能：

    1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數R值為0.990。

    2.特異性：不與其它細胞因子反應。

    3.重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

大鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟：

    1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

    2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個(gè)標準品和空白孔建議做復孔。每個(gè)樣品根據自己的數量來(lái)定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。

    3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

    4.甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

    5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

    6.甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

    7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

    8.取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

    9.在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

建議使用的實(shí)驗方案：

    6號標準品以上的結果為非線(xiàn)性的，根據此標準曲線(xiàn)無(wú)法得到精確的結果。

    引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：

    1）試劑因素；

    2）操作因素。

    3）標本因素；

 大鼠ELISA檢測試劑盒注意事項：

    1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未

    用完，板條應裝入密封袋中保存。

    2. 濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。

    3. 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使排槍加樣。

    4. 請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn)，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計3算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

    5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6. 底物請避光保存。

    7. 嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

    8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

    9. 本試劑不同批號組分不得混用。

    10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準。

    結果判斷與分析：

    1、儀器值：于波長(cháng)450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。

    2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的ICAM-1/CD54標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線(xiàn)，樣品的ICAM-1/CD54含量可根據其OD值由標準曲線(xiàn)換算出相應的濃度。

    3、檢測值范圍：0-80ng/ml

    4、敏感度：0.1ng/ml

    大鼠ELISA酶聯(lián)檢測試劑盒適用領(lǐng)域：

    1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位

    2.研究抗酶抗體的合成

    3.顯現微量的免疫沉淀反應

    4.定量檢測體液中抗原或抗體成份